Caracterización in vitro e in vivo de los dominios de la acetiltransferasa pcaf

Resumen

El DNA es la molécula biológica que contiene la información genética de los organismos y en las células eucariotas se encuentra en el núcleo. Dadas las dimensiones del DNA es necesario compactarlo para poder almacenarlo en el espacio limitado del núcleo. Esta compactación se consigue gracias a la colaboración de unas proteínas, las histonas, constituyendo la cromatina. El empaquetamiento del DNA en el núcleo no tiene un papel meramente estructural sino que también es funcional. Presentado un impedimento para cualquier proceso que requiera tener acceso a la información genética. Para que los procesos celulares tengan lugar es necesario por tanto regular el grado de compactación de la cromatina. Una de las maneras de hacerlo es a través de las modificaciones postraduccionales que ocurren fundamentalmente en la región N-terminal de la s histonas. La mas importante en el desarrollo de este trabajo es la acetilación, una modificación que se basa en la transferencia de un grupo acetilo proveniente del acetil coenzima A a un residuo de lisina, que neutraliza la carga positiva de las histonas y disminuye su afinidad por el DNA, quedando este de una forma desplegada y mas accesible a los factores de transcripción, es por este motivo que la acetilación se ha relacionado siempre con regiones del genoma transcripcionalmente activas. Esta reacción esta catalizada por los enzimas acetitransferasa de histonas (HATs). Parece que la acetilación no tiene solo consecuencias meramente estructurales y la existencia de dominios proteicos que reconocen las lisinas acetiladas, los bromodominios, apoya esta hipótesis. Los bromodominos se encuentran presentes en muchas proteínas asociadas a la cromatina y en prácticamente todas las HATs conocidas y podrían ayudar a realizar funciones esenciales en la célula, como la remodelación de la cromatina o la activación transcripcional, anclando a las HATs a la cromatina acetilada. En este trabajo hemos querido analizar los dominios funcionales de la acetiltransferasa PCAF, que incluye la caracterización de su bromo dominio en las funciones conocidas de PCAF y el análisis de la autoacetilación intramolecular de PCAF en su localización celular.