Estudio de la migración de precursores mesenqulmales. Estrategia para la mejora de sus propiedades migratorias

Resumen

Las células madre mesenquimales (MSCs, del inglés mesenchymal stem cells) presentan unas propiedades prometedoras para poder ser usadas en terapia celular. Son capaces de migrar, diferenciarse, secretar factores solubles, inmunomodular las respuestas del sistema inmune y son consideradas "hipoinmunogénicas."Estas propiedades las convierten en buenas candidatas para el tratamiento de una gran diversidad de enfermedades o trastornos. A pesar de los grandes avances en el campo y la utilización de MSCs en ensayos clínicos se desconoce todavía mucha información acerca de la biologla de estas células. Para el éxito de la terapia, las células suministradas tienen que alcanzar el tejido dañado o afectado e integrarse en él para poder ejercer su función. Sin embargo, la eficacia en la llegada y permanencia de las células en el tejido diana sigue presentando un gran reto. Con el objetivo de conocer mejor la migración de los precursores mesenquimales (MPs, del inglés mesenchymal precursors) obtuvimos células de distintos tejidos. Los resultados mostraron que los MPs presentaban blebs dinámicas de manera espontánea cuando se encontraban en subconfluencia en cultivo. Cuando las células no estaban adheridas y tenían forma redondeada las blebs estaban generalizadas por la membrana plasmática, mientras que cuando las células se adherían y adquirían forma elongada, estas estructuras se disponían polarizadas en los frentes de avance en combinación con los lamelipodios. Comprobamos que la F-actina, RhoA y las proteínas del grupo ERM (ezrina, radixina y moesina; unen los filamentos de actina con la membrana plasmática) formaban parte de su estructura. Las blebs se veían afectadas por la adherencia al sustrato y se inhibía su formación al al'1adir blebbistatin. Los ensayos de migración mostraron una correlación entre la capacidad de migración de los MPs y el porcentaje de blebs que presentaban. Además, la migración disminuía significativamente cuando se añadía blebbistatin en el cultivo. Se propuso como estrategia para mejorar la capacidad de migración de los MPs la aplicación de ultrasonidos (US) terapéuticos empleando la mínima intensidad del dispositivo. La estimulación de las células no afectó ni a su viabilidad ni a la capacidad de proliferación. No se produjeron cambios en la morfología, ni en las agrupaciones de las células, así como no hubo cambios detectables a nivel del citoesqueleto. Las capacidades de las células de migrar e invadir también se mantuvieron constantes a pesar del tratamiento. Finalmente, no se detectaron variaciones en la expresión génica de los genes ROCK1, integrina 1. laminina 1. colágeno tipo I y factor de crecimiento transformante 1. previamente involucrados en la estimulación con US. Tomando en conjunto los resultados serla conveniente continuar con el estudio del papel de las blebs en entornos 3D e in vivo, así como investigar la aplicación de US utilizando variaciones de los parámetros empleados.