Validación de un nuevo método de obtención de plasma rico en plaquetas para su aplicación en úlceras cutáneas crónicas

  1. CONDE MONTERO, ELENA
Dirigida por:
  1. José M. Martínez González Director/a
  2. Ricardo Suárez Fernández Director
  3. Jesús Millán Núñez-Cortés Director/a

Universidad de defensa: Universidad Complutense de Madrid

Fecha de defensa: 08 de abril de 2016

Tribunal:
  1. José Vicente Sanz Casado Presidente/a
  2. P. de la Cueva Dobao Secretario/a
  3. Gastón Roustan Gullón Vocal
  4. Jesús Cuevas Santos Vocal
  5. Stéphane Dalle Vocal

Tipo: Tesis

Resumen

INTRODUCCIÓN. Las heridas crónicas se caracterizan por presentar una fase inflamatoria anormalmente prolongada, que implica una destrucción continuada de proteínas de matriz y factores de crecimiento. El plasma rico en plaquetas (PRP), por su riqueza en factores de crecimiento, representa una interesante alternativa de tratamiento. Se han comercializado diversos métodos para obtener PRP, que implican el uso de kits desechables, de coste variable. HIPÓTESIS. La hipótesis de nuestro trabajo es que con nuestra técnica obtenemos moléculas bioactivas funcionales en similar grado que los métodos comercializados que implican la compra de kits de consumibles y, consecuentemente, un mayor gasto. OBJETIVOS. 1. Validar un nuevo sistema de producción de plasma rico en plaquetas autólogo, ambulatorio, sencillo, barato y reproducible: a) Comprobar que éste proporcione la suficiente concentración de plaquetas y determinar si la concentración plaquetaria se correlaciona con la cantidad de factores de crecimiento liberados. ¿b) Determinar la cinética de liberación de factores de crecimiento en el gel de hidroxietilcelulosa, y compararla con la del PRP sin añadirle la hidroxietilcelulosa. ¿c) Verificar que no active o fragmente las plaquetas por su manipulación, y las mantenga íntegras hasta el momento de su utilización. ¿2. Determinar la utilidad clínica de la aplicación de nuestro método de obtención de plasma rico en plaquetas en el tratamiento de úlceras cutáneas crónicas que no han respondido a tratamiento convencional. MÉTODO. El estudio se compone de dos partes: 1. Estudio transversal con muestras de donantes sanos para validar la técnica. 2. Estudio experimental no controlado para evaluar la utilidad clínica del método. RESULTADOS.1. Estudio de validación: La media de concentración de plaquetas obtenida fue 1.59 veces superior a la concentración de plaquetas basal (DT, 0.39). Con respecto a la cinética de liberación, EGF (Factor de Crecimiento Epidérmico) y TGF (Factor de Crecimiento transformante) tuvieron una mayor liberación en el PRP gelificado. Por el contrario, la concentración de PDGF-BB (Factor de Crecimiento Derivado de las Plaquetas) fue superior en el PRP sin hidroxietilcelulosa. La proteína plasmática IGF (Factor de Crecimiento Insulínico), está presente en mayor cantidad en las muestras con más proporción de plasma (PRP no gelificado con hidroxietilcelulosa). La visualización de las muestras mediante microscopía electrónica verificó la preservación de la integridad plaquetaria. 2. Estudio clínico: Se incluyeron once pacientes con 13 úlceras. La media de sesiones de tratamiento fue de 9 (6-15). Se consiguió la cicatrización completa en 10 úlceras. Se halló un impacto significativo en la calidad de vida. CONCLUSIONES. 1. Nuestro sistema de producción de plasma rico en plaquetas es autólogo, ambulatorio, sencillo, barato y reproducible. a) El método presentado obtiene una concentración de plaquetas superior a la basal. La cantidad de factores de crecimiento liberados no se correlaciona con la concentración de plaquetas. b) Las diferencias entre la cinética de liberación de factores de crecimiento en PRP con gel de hidroxietilcelulosa y la del PRP sin añadirle este polímero bioactivo es factor dependiente. ¿c) Al no haber diferencias significativas en los hallazgos de microscopía electrónica entre los diferentes preparados (sangre total, PRP y PRP gel), se puede concluir que nuestra técnica de obtención y gelificación de PRP preserva la integridad de las plaquetas y no induce una activación precoz de las mismas. ¿2. Este método representa una alternativa de tratamiento eficaz para el manejo de úlceras crónicas que no responden a tratamiento convencional, tanto de manera aislada como en combinación con otras técnicas regeneradoras. a) Para establecer unas claras indicaciones de uso y extender su empleo en la práctica clínica habitual, se precisan ensayos clínicos bien diseñados que apoyen su utilidad.